Corning® BIOCOAT™ Hepatocyte Differentiation Environment 肝细胞分化系统试剂355056

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Corning® BIOCOAT™ Hepatocyte Differentiation Environment 肝细胞分化系统试剂盒 | 货号:355056

核心产品定位

专为体外长期(≥3周)维持原代肝细胞分化表型而设计的 一体化、无血清、成分明确 的完整培养系统。系统性地解决了肝细胞体外培养易去分化、功能丧失的难题。

详细产品信息

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Corning® BIOCOAT™ Hepatocyte Differentiation Environment 肝细胞分化系统试剂盒 | 货号:355056到货照片

系统核心组件与详细技术参数

本试剂盒是一个经过优化的集成系统,包含以下三个关键部分:

  1. Hepato-STIM™ 无血清限定培养基 (500 mL)

    • 基础:基于 Williams' E 培养基 优化。

    • 核心添加物:已含有地塞米松ITS+™ Universal Culture Supplement(一种激素与代谢产物的浓缩配方)。

    • 重要特性

      • 不含血清,成分明确,批间差异小。

      • 不含抗生素,推荐用于原代细胞时由用户自行添加。

      • 内毒素含量 < 0.1 EU/mL

      • 生产用人源材料经检测,HBsAg、HCV、HIV-1/2 抗体均为阴性

  2. 表皮生长因子 (EGF) 补充剂

    • 规格5 μg,冻干粉。

    • 作用:对维持肝细胞培养至关重要,需在使用前添加到 Hepato-STIM 培养基中。

  3. CORNING® BIOCOAT™ MATRIGEL® 基质包被细胞培养板

    • 规格6孔板,5块

    • 包被物MATRIGEL 基底膜基质(提取自EHS小鼠肿瘤,主要含层粘连蛋白、IV型胶原、巢蛋白和硫酸肝素蛋白聚糖)。

    • 关键优势:优于传统的I型胶原,是维持肝细胞体外分化表型的首选基质,能诱导肝细胞形成特征性的球形聚集体

已验证的性能与典型结果

  • 长期培养:系统已验证可支持分化肝细胞培养至少3周超过文献报道的基于I型胶原培养系统的zui大时长

  • 高贴壁率:接种后1-2小时内,>90% 的细胞贴附于MATRIGEL基质。

  • 维持分化表型

    • 形态:细胞保持球形,不发生铺展(见图1a与胶原I的对比图1b)。

    • 功能:可长期维持细胞色素P450表达等关键肝细胞特异性功能。

  • 低增殖性:培养期间细胞数量仅轻微增加,符合分化肝细胞的特征,系统优化于分化维持而非细胞生长

主要应用领域

  • 肝细胞分化与功能研究

  • 药物代谢与转运研究

  • 药物肝毒性评估

  • 肝脏疾病模型构建(研究疾病导致的肝功能损伤或改变)

使用、储存与重要注意事项

  • 储存条件

    • 培养基与EGF2-8°C,避光,切勿冷冻

    • MATRIGEL包被板:收货后立即存于 -20°C,使用前解冻,勿反复冻融

  • 培养基配制

    1. 用1 mL Hepato-STIM培养基复溶EGF冻干粉。

    2. 将EGF溶液加入500 mL Hepato-STIM培养基中。

    3. 添加5 mL 200mM L-谷氨酰胺储备液(终浓度2mM,需用户自备)。

    4. 配制好的完全培养基可在2-8°C保存6周

  • 细胞接种与操作

    • 推荐接种密度8×10⁵ 细胞/孔(6孔板)。

    • 操作轻柔:因MATRIGEL凝胶脆弱,加液、换液需沿孔壁上缘缓慢进行,避免破坏凝胶层。

    • 消化回收:推荐使用Dispase需用户自备,货号354235)进行消化。

  • 安全与法规

    • 本品仅供科研使用,不可用于诊断。

    • 建议在生物安全二级(BSL-2)条件下操作,并遵循良好实验室规范。

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