北京孚博生物科技有限公司

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项目评估

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2-3月；具体项目有一定差别

30000起，具体请询价

靶点设计

一般在不同转录产物的共同外显子上设计3-6个靶点，靶点位置尽量在基因CDS的前1/3，ATG之后，最好能破坏重要的domain和所有的转录产物isoform

载体构建和病毒包装

确定转染方案；选择合适的普通载体或病毒载体--普通Cas9载体、慢病毒Cas9载体和腺病毒Cas9载体

内源活性筛选

转染细胞或感染细胞，使用Puro或Blasticidin筛选，提取基因组DNA。使用T7E1酶验证打靶载体的活性。将有效的突变型PCR产物测序验证

单克隆筛选与扩大培养

无限稀释到每孔1个细胞的数量，每株细胞铺至少2个96孔板。细胞长好够，验证内源活性并送测

支原体单克隆质量检测

检测细胞质量确保无污染

交付单克隆及项目报告

交付详细项目报告