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糖基化定量蛋白质组分析

蛋白质的N-糖基化位点修饰是最重要的蛋白质翻译后修饰之一，主要在复杂的多细胞或组织形成过程中起关键作用。蛋白质的N-糖基化修饰位点具有保守的氨基酸序列NX（S/T），其中X为除脯氨酸以外的其它氨基酸。

孚博生物为您提供蛋白质组N-糖基化位点的鉴定与分析技术服务。我们利用凝集素（lectin）富集N-糖基化肽段，然后用N-糖酰胺酶（PNGase）在H218O中切除连接在天冬酰胺残基（Asn）上的糖链。最后用高精度LC-MS质谱仪检测脱糖后的肽段，并通过MASCOT软件检索数据库，确认脱糖后分子量与其理论分子量的变化以及糖基化修饰肽段的序列，从而确定该蛋白质的N-糖基化位点。N-糖基化位点确定之后，再利用label-free的原理对其进行定量分析。

服务流程

l  客户沟通

l  样品寄送

l  蛋白提取

l  蛋白酶解

l  蛋白、肽段修饰富集

l  H₂¹⁸O中切除糖链

l  质谱分析

l  修饰蛋白定量分析

l  实验报告

样品要求

·       SDS-PAGE条带：5个以上可见考染条带。

·       溶液（目标蛋白质）：目标蛋白总量>50μg，目标蛋白浓度>80%。

·       溶液（大规模混合蛋白质）：蛋白总量>1mg，蛋白浓度>1μg/μl